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10.19813/j.cnki.weishengyanjiu.2023.01.022

柱前衍生-稳定同位素标记-超高效液相色谱-四极杆静电场轨道阱高分辨质谱法测定血清中25-羟基维生素D

引用
目的 建立快速、准确检测血清中25-羟基维生素D3[25-hydroxyvitamin D3,25(OH)D3]、25-羟基维生素 D2[25-hydroxyvitamin D2,25(OH)D2]含量的柱前衍生-稳定同位素标记-超高效液相色谱-四极杆静电场轨道阱高分辨质谱的方法,并用此方法诊断维生素D缺乏症,评估人群维生素D营养状况.方法 加入同位素内标的血清样品采用乙酸乙酯-正己烷溶液(2:1,V/V)提取,离心后氮气吹干,以4-苯基-1,2,4-三唑啉-3,5-二酮(4-phenyl-1,2,4-triazoline-3,5-dione,PTAD)作为衍生化试剂与目标化合物进行衍生化反应.反应产物采用BEH C18色谱柱(2.1 mmx50 mm,1.7 μm)进行分离,以0.1%甲酸水溶液-乙腈梯度洗脱.质谱采用电喷雾正离子模式和平行反应监测对目标物进行检测,内标法定量.结果 25(OH)D3和25(OH)D2的检出限为0.01 ng/mL,定量限为0.03 ng/mL.25(OH)D2浓度的线性范围为0.5~40.0 ng/mL,25(OH)D3浓度的线性范围为2.5~200.0 ng/mL,二者在浓度范围内线性良好,相关系数(r2r)大于0.995.25(OH)D3和25(OH)D2的回收率分别为95.7%~101.3%和 98.7%~108.6%,相对标准偏差分别为 0.5%~4.9%和 2.2%~3.4%(n=5).测定参考物质NIST SRM 972a的Level 2血清中25(OH)D3和25(OH)D2的准确度分别为104.8%和94.9%.利用该方法检测北京市116名孕妇孕早期血清中 25(OH)D3 和 25(OH)D2 水平[M(P25,P75)]分别为 25.7(20.8,32.6)ng/mL和0.8(0.4,1.1)ng/mL.结论 本方法灵敏度高、定性准确,适用于人群维生素D营养状况的评价和监测.

超高效液相色谱-四极杆静电场轨道阱高分辨质谱、25-羟基维生素D325-羟基维生素D2、衍生化

52

R446.11;R153.1;O652.1(诊断学)

科技基础资源调查专项;科技基础资源调查专项

2023-04-23(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共7页

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卫生研究

1000-8020

11-2158/R

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2023,52(1)

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