N-乙酰半胱氨酸激活蛋白激酶B通路减轻镉诱导的睾丸间质细胞凋亡

摘要：

目的 探究N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)基于蛋白激酶B(protein kinase B,PKB,又称AKT)通路对镉诱导小鼠睾丸间质细胞凋亡的调控机制.方法 将小鼠睾丸间质细胞(TM3)分为对照组、镉染毒组(Cd,5、10、20、30、40和 50 μmol/L)、NAC 组(NAC,500 μmol/L)及 NAC+镉染毒组(500 μmol/L NAC+20μmol/L Cd),其中NAC+Cd染毒组先用NAC预处理30 min,再联合镉染毒24 h.CCK8测定细胞存活率,Hoechst染色检测细胞形态,流式细胞仪分析细胞凋亡率,同时测定丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量,Western blot免疫印迹法分别检测AKT蛋白、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)和B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)的表达水平.结果 镉可抑制TM3细胞增殖且存在剂量-效应关系.细胞形态观察发现,随着镉染毒浓度的增加,细胞缩小变圆甚至脱落,核致密浓染;NAC预处理可明显改善镉对TM3细胞的损伤,浓染细胞明显减少.镉染毒组的MDA含量为(1.56±0.11)μmol/mg prot,较对照组显著升高(P＜0.01),GSH水平为(1.28±0.25)μmol/mg prot,明显低于对照组(P＜0.01);NAC预处理可降低细胞内MDA含量,提高GSH水平,与镉染毒组相比,差异有统计学意义(P＜0.01);Western blot结果显示,NAC+Cd组磷酸化AKT蛋白和Bcl-2蛋白表达水平分别为0.65±0.05和0.45±0.03,均显著高于Cd染毒组(P＜0.01),并且Bax/Bcl-2比值为1.54±0.15,较镉染毒组显著降低(P＜0.01).结论 NAC可抑制镉诱导的TM3细胞损伤及其凋亡,可能与NAC改善细胞氧化应激状态,激活TM3细胞AKT通路和降低Bax/Bcl-2比值有关.

关键词：N-乙酰半胱氨酸、镉、睾丸间质细胞、细胞凋亡、蛋白激酶B通路

所属期刊栏目：51

分类号：R114(卫生基础科学)

资助基金：国家自然科学基金;江苏省研究生科研与实践创新计划项目

在线出版日期：2022-08-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：632-637