10.19813/j.cnki.weishengyanjiu.2021.06.018
人血浆多不饱和脂肪酸气相色谱检测方法的优化
目的 优化气相色谱法检测人血浆中多不饱和脂肪酸的含量.方法 血浆中加入十七碳烯酸甲酯内标液,经无水甲醇和正己烷超声水浴提取血浆总脂,采用硫酸-甲醇法甲酯化血浆多不饱和脂肪酸,离心后取上清液过膜,经氮气吹干后,正己烷复溶.用HP-88弹性石英毛细管柱(30 m×0.25 mm,0.2 μm)分离亚油酸(linoleic acid,LA)、α-亚麻酸(α-linolenic acid,α-ALA)、花生四烯酸(arachidonic acid,AA)和二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA).采用程序升温,内标-标准曲线法定量.结果 40℃超声水浴20 min可达到较高的总脂萃取率,且时间较短.4种脂肪酸在检测范围内浓度与峰面积比值线性关系良好(r>0.995);方法的检出限和定量限分别为0.24~0.64和0.96~2.56 μg/mL;日内及日间稳定性的相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)分别为0.01%~0.04%和0.02%~0.07%;回收率为84.05% ~ 101.23%,测定值的RSD为1.21%~6.77%(n=3).血浆和血清中α-ALA、AA和DHA浓度差异均无统计学意义(P>0.05);以M(P25,P75)表示,血清LA浓度[93.38(79.18,116.41) μg/mL]高于血浆[72.12(50.93,101.13) μg/mL],差异有统计学意义(P<0.05).结论 该方法总脂萃取率高,时间较短,采用内标.标准曲线法可消除上样量对结果的影响,结果准确,可用于大样本人群血浆脂肪酸含量的检测.
气相色谱法;多不饱和脂肪酸;血浆
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R331.1;O657.7(人体生理学)
国家自然科学基金No-81730091
2021-12-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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