PTEN在石英诱导的HELF细胞FAK和α-SMA改变中的作用

摘要：

目的 探讨第10号染色体丢失性磷酸酶-张力蛋白(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome 10,PTEN)在石英诱导人胚肺成纤维细胞(human embryo lung fibroblasts,HELF)黏附斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)和平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)改变中的作用.方法 分别在含0、25、50、100和200 μg/cm2石英的低血清培养基中培养HELF细胞24 h,用细胞计数试剂盒8(cell counting kit-8,CCK8)法确定石英染毒HELF细胞的剂量,同时在倒置显微镜下观察不同剂量石英对HELF细胞形态的影响.50 μg/cm2石英溶液分别染毒HELF细胞0、1、2、4、8、12和24h,0h组HELF细胞作为对照组,并用Western blot实验检测HELF在不同染毒时间点的PTEN、p-PTEN、FAK、p-FAK和α-SMA蛋白水平.2×10-3 mol/L PTEN抑制剂VO-Ohpic与石英共同处理HELF细胞24 h,同时设空白HELF细胞组和HELF石英染毒组,用Western blot实验检测各组HELF细胞FAK、p-FAK和α-SMA蛋白表达情况.结果 随着石英浓度增加,HELF细胞活力呈先增加后下降的变化,其中50 μg/cm2石英染毒组细胞活力(144.91±5.10)显著高于0 μg/cm2组(101.23±6.57)(P＜0.05).与对照组相比,12 h 和24 h 的 PTEN 和 p-PTEN 表达水平均显著降低”PTEN:12 h 为(0.44±0.08),24 h 为(0.25±0.02);p-PTEN:12 h 为(0.09±0.01),24 h 为(0.01±0.00)”;而 12 h(0.92±0.05)和24 h(0.89±0.01)的 FAK,以及24h 时的 p-FAK(0.77±0.02)和α-SMA(1.32±0.01)表达水平则显著升高(P＜0.05).石英和PTEN抑制剂共同处理组HELF细胞FAK(0.25±0.03)、p-FAK(0.40±0.02)和 α-SMA(0.36±0.01)表达水平均显著高于石英染毒组(P＜0.05).结论 在石英诱导HELF细胞FAK、p-FAK和α-SMA表达水平增高的过程中,PTEN负调控FAK、p-FAK和α-SMA表达水平.

关键词：石英、人胚肺成纤维细胞、第10号染色体丢失性磷酸酶-张力蛋白、黏附斑激酶、平滑肌肌动蛋白、矽肺

所属期刊栏目：50

分类号：R135.2;Q55(劳动卫生)

资助基金：国家自然科学基金;职业健康风险评估与国家职业卫生标准制定项目

在线出版日期：2021-05-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：223-229