多重寡核苷酸连接-聚合酶链式反应-通用基因芯片检测食源性致病菌方法的建立

摘要：

目的 建立一种基于多重寡核苷酸连接-聚合酶链式反应(MOL-PCR)的食源性致病菌通用基因芯片检测方法.方法 针对细菌性食物中毒8种常见致病菌,在各自特异性引物之间设计一对首尾相接的上、下游检测探针.采用多重PCR富集靶序列并作为模板,通过多重连接酶检测反应及通用不对称PCR标记,获得大量含标签互补序列(Anti-tag)的荧光标记单链产物,可与芯片上固定的标签序列(Tag)进行杂交检测.结果 该方法能特异性地鉴别单一和多重目标菌感染.纯培养物的检测灵敏度为(1.1 ～8.5)×102 CFU/mL.对96份食物中毒和临床腹泻样本检测,芯片结果与常规分离与生化鉴定及荧光定量PCR结果一致.结论 该方法为快速、准确、灵敏、高通量地鉴定食源性疾病的病原菌提供了一种新型检测平台.

关键词：食源性致病菌、多重寡核苷酸连接-聚合酶链式反应、通用基因芯片

所属期刊栏目：46

分类号：R155.51;R155.3(营养卫生、食品卫生)

资助基金：陕西省自然科学基础研究计划项目2015JM3112;西安市社会发展引导计划-医学研究项目SF15162

在线出版日期：2017-04-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：225-231