转基因水稻中重组人乳铁蛋白的分离纯化及其抑菌活性研究

摘要：

目的 研究从转基因水稻中分离纯化重组人乳铁蛋白(recombinant human lactoferrin,rhLF),并检测其是否具有抑菌活性.方法 通过饱和硫酸铵分级沉淀从转基因水稻中分离rhLF后,经CM Sepharose FF交换层析和Sephadex G25分子筛层析进一步纯化rhLF.采用微量肉汤稀释法检测不同浓度rhLF(0.25、0.50、1.00、2.00、4.00和5.00mg/ml)对鼠伤寒沙门菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌、单增李斯特菌的抑制情况.结果 通过分离和纯化成功获得纯度较高的rhLF(纯度约90％),经考马斯亮蓝染色,Western blot和质谱仪鉴定分析确定为rhLF,分子量约为79 kD.抑菌实验显示,5.00和4.00mg/ml rhLF对鼠伤寒沙门菌和金黄色葡萄球菌有持久的抑制效果,2.00和1.00mg/ml rhLF在实验后期也表现出明显的抑菌作用,0.50mg/ml及以下浓度则没有抑菌效果.5.00和4.00mg/ml rhLF在18h内对蜡样芽孢菌表现出一定的抑制效果；5.00mg/ml rhLF对单增李斯特菌在18h内有抑制作用.结论 从转基因水稻中可成功分离和纯化rhLF,纯化后蛋白仍具有明显的抑菌活性.

关键词：转基因水稻、重组人乳铁蛋白、分离提纯、抑菌活性

所属期刊栏目：42

分类号：TS201.6;TS207.4(食品工业)

资助基金：国家转基因生物新品种培育科技重大专项20011ZX08011-005

在线出版日期：2013-08-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：399-404