丝状噬菌体pⅧ展示系统表达赭曲霉毒素A模拟表位及应用研究
目的 传统赭曲霉毒素A(OTA)竞争抗原毒性强、成本高、制备难度大.将OTA模拟表位展示于丝状噬菌体pⅧ表面,获得无毒、易于制备的OTA竞争抗原替代物.方法 构建带有OTA模拟表位的重组噬菌粒pC89-COTA,为了提高OTA模拟表位与抗体的结合率,在OTA模拟表位序列5’端引入了肠激酶酶切位点.噬菌粒转化进大肠杆菌XL1-blue后再经野生KM13噬菌体感染,获得带有OTA模拟表位的重组噬菌体.用该噬菌体代替竞争抗原建立OTA的无毒ELISA分析方法.结果 成功表达出带有OTA模拟表位的重组噬菌体,经肠激酶酶切的OTA模拟表位噬菌体与OTA抗体的结合效率显著高于未酶切的噬菌体.利用酶切后的噬菌体建立OTA的无毒ELISA分析方法,其最低检出限为100pg/ml,线性范围为250pg/ml～1000pg/ml.进行加标回收实验,回收率为99.8％ ～ 112.3％,相对标准偏差为8.19％ ～11.64％,测试16份市售样品,阳性率为31.25％.结论 成功表达了OTA模拟表位噬菌体,建立了OTA的无毒ELISA检测方法.
噬菌体展示、噬菌粒、赭曲霉毒素A、酶联免疫吸附测定
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TS207.4;R155.31(食品工业)
国家自然科学基金项目30860240
2013-01-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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