单核细胞增生李斯特菌脉冲场凝胶电泳分型技术的内切酶质量评估

摘要：

目的 对单核细胞增生李斯特菌脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型的相关影响因素进行分析和探讨,并建立该菌的PFGE双酶切技术.方法 分别利用限制性内切酶Asc I和Apa I对1/2a、1/2b、1/2c、3a和4b型的单核细胞增生李斯特菌进行PFGE分析(包括1种品牌的Asc I和5种品牌的Apa I),通过指纹图谱的比较,优化各种内切酶的实验参数.结果 Asc I酶切产生11条左右清晰的DNA指纹图谱条带,Apa I酶切产生的条带数量与之相似,但其中约10%的菌株(1/2a、1/2b血清型)均产生消化不完全的DNA片段.同时用5种品牌的ApaI酶消化,并改变消化温度、提高酶浓度、延长酶消化时间均无法克服此现象.结论 Asc I酶适于1/2a、1/2b、1/2c、3a和4b血清型的单核细胞增生李斯特菌的分型,但Apa I酶适于多数1/2a和1/2b血清型的分型.

关键词：单核细胞增生李斯特菌、脉冲场凝胶电泳、分子分型

所属期刊栏目：39

分类号：R155.31;TS207.3(营养卫生、食品卫生)

资助基金：全国污染物监测网及食源性病原菌监测网项目

在线出版日期：2010-07-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：368-373