应用随机肽库筛选展示河豚毒素模拟表位噬菌体
目的 利用噬菌体随机肽库筛选展示河豚毒素(TTX)模拟抗原表位的噬菌体,并以其替代毒素建立免疫学检测方法.方法 以抗TTX单克隆抗体为靶分子,从以融合蛋白形式表达在丝状噬菌体M13外壳蛋白Ⅲ表面的随机七肽库中进行生物亲和淘选,用ELISA法鉴定阳性克隆.结果 通过4轮淘选,获得了7株能与抗TTX单克隆抗体特异性结合的噬菌体,采用间接竞争ELISA,筛选到3株能抑制TTX的阳性克隆.其中以4号噬菌体建立的免疫检测方法,线性范围为1-20ng/ml(TTX毒素浓度),R2=0.9947,检测下限为1ng/ml.结论 从噬菌体七肽库筛选到了展示TTX模拟抗原表位的噬菌体,淘选出来的噬菌体粒子可作为毒素的替代品用于免疫学检测.
河豚毒素、噬菌体展示肽库、模拟表位、ELISA
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R155.51;Q593.2(营养卫生、食品卫生)
2010-07-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
299-301,305