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铅致原代培养海马神经元凋亡及Bcl-2、Bax、p53和NOS1基因表达的影响

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目的 观察铅对原代培养海马神经元的致凋亡作用并初步探讨其机制.方法 原代培养乳大鼠海马神经元,不同浓度的醋酸铅(50、100和200μg/ml)染毒后,Giemsa染色观察铅诱导海马细胞凋亡的形态学改变,流式细胞仪检测铅诱导海马神经元的凋亡率,免疫细胞化学染色观察各浓度组细胞Bcl-2、Bax和p53表达,激光扫描共聚焦显微镜定量分析各浓度组神经元胞浆中游离Ca2+ 的平均荧光强度.结果 Giesma染色观察发现一定浓度醋酸铅作用于海马神经元后出现凋亡的形态学改变,且与剂量相关;流式细胞术检测结果铅浓度分别为50、100、200μg/ml作用细胞24h后,可致海马神经元凋亡率增加,与对照组相比均有统计学意义(P<0.01);免疫细胞化学染色结果表明Bcl-2蛋白表达随染铅剂量增大而减少.染色强度逐渐降低,Bax、p53表达随染铅剂量增大而上调,与对照组相比,细胞积分光密度(IOD)值有统计学意义(P<0.01);激光共聚焦显微镜检测结果显示随着醋酸铅剂量的增大,细胞内液Ca2+浓度也随着增大,醋酸铅3个浓度组的平均荧光强度均显著高于正常对照(P<0.01),并有剂量反应关系.结论 铅可诱导海马神经元不同程度的凋亡,提示细胞内Ca2+ 浓度升高可能与铅致海马神经元损伤和诱导其凋亡有重要关系.推测铅在一定浓度范围内可能影响海马神经元在学习记忆等功能的正常发挥.

铅、海马神经元、凋亡、基因表达

39

Q593.2;Q786

甘肃省科技支撑计划0708NKCA128;090NKCA106

2010-07-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

235-238

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