DNA聚合酶β对苯并[a]芘致DNA损伤修复的影响
目的 揭示聚合酶β(pol β)的表达水平与苯并[a]芘(BaP)诱导的DNA损伤效应的关系.方法 采用3种具有相同遗传背景的小鼠胚胎成纤维细胞pol β野生型(polβ+/+)、pol β缺陷型(pol β-/-)和野生型pol β高表达型(pol β oe)作为模型细胞.首先用RT-PcR和western bolt鉴定3种细胞中pol β在mRNA和蛋白质水平的表达情况,然后通过MTT试验和单细胞凝胶电泳(彗星试验)观察BaP作用下3种细胞的存活率及DNA损伤和修复效应.结果 3种细胞在pol β mRNA和蛋白表达水平上存在明显差异,polβ-/-细胞中pol β基因缺失,而pol β oe细胞中pol β基因则较野生型pol β+/+细胞高出2倍以上;BaP能诱导3种细胞DNA的损伤以及细胞存活率的降低;与pol β+/+细胞相比,pol β-/-细胞的IC_(50)更低,DNA损伤更严重且更加不易修复;反之,pol β oe细胞的IC_(50)更高,DNA损伤效应更弱,DNA修复速率加快.结论 pol β在修复外源性致癌物BaP导致的DNA损伤中发挥着重要的作用,pol β基因缺陷使细胞DNA修复能力降低,而pol β基因的高表迭则能帮助细胞应对DNA损伤,在一定程度上对细胞的存活起到了保护作用.
DNA、聚合酶、β苯并[a]芘、损伤
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R730.231;Q523(肿瘤学)
国家自然科学基金资助项目30872079
2010-06-02(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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