10.3969/j.issn.1000-8020.2008.03.005
bax基因siRNA序列的筛选及其对铝致神经胶质瘤细胞凋亡的影响
目的 应用RNA干扰技术降低促凋亡基因bax的表达,以阻抑铝诱导的神经胶质瘤细胞凋亡.方法 设计了3对阻抑bax基因表达的siRNA序列,对神经胶质瘤细胞进行了转染,根据不同siRNA序列在不同转染剂量、不同转染时间的细胞活力,找到bax siRNA转染的最佳转染剂量和最适转染时间.依据RNA干扰前后bax基因的表达变化筛检出最有效的siRNA序列.用荧光染色法、荧光定量PCR法和免疫组织化学染色法分别检测其转染效率、对基因表达的干扰效率及对蛋白表达的阻抑效应.结果 最有效的针对bax基因的siRNA序列为siRNA1,该序列的转染效率90%,时bax基因表达的干扰效率为62.3%.最佳转染后检测点为转染后72h,最适转染剂量为20nmo/L.结论 阻抑bax基因表达的siRNA序列能有效干扰bax基因和蛋白的表达,降低凋亡率.
bax、RNA干扰、siRNA、铝、凋亡、神经胶质细胞
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Q593.2;R730.231;R994.6;O614.433
国家自然科学基金资助项目30671777,30740032;教育部博士点基金资助项目20050114001
2008-09-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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