10.3969/j.issn.1005-7021.2015.04.005
以 agr基因为靶点快速检测金黄色葡萄球菌方法的建立
本文旨在建立一种以agr基因为靶点,快速检测金黄色葡萄球菌的环介导等温扩增( LAMP)方法。首先,针对金黄色葡萄球菌附属基因调控基因agr序列,设计了4条特异性引物;优化了LAMP体系中甜菜碱、dNTP浓度、长短引物比等因素;通过对14株不同金黄色葡萄球菌菌株和4株其他常见食品致病菌株进行检测,评估引物特异性。结果表明,在Mg2+浓度为2.4 mmol/L,dNTP浓度为0.8 mmol/L,甜菜碱浓度为0.1 mol/L,长短引物比为1:8,65℃反应50 min条件下扩增可达最佳效果。优化后的LAMP对14株金黄色葡萄球菌均表现为阳性,对4株非金黄色葡萄球菌菌株表现为阴性,证明引物具有特异性。本文首次利用agr基因作为靶基因片段,建立了一个简单、快速、特异性强的检测金黄色葡萄球菌的方法,在食品安全检测方面极具意义。
金黄色葡萄球菌、agr、环介导恒温扩增、快速检测
S76;R37
科技部十二五国家科技支撑计划2012BAD38B05;中央高校基本科研基金DC12010118
2015-09-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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