10.3969/j.issn.1005-7021.2015.01.003
对虾白斑综合征病毒囊膜蛋白VP110 N端结构特征、原核表达及检测
VP110为对虾白斑综合征病毒( White Spot Syndrome Virus,WSSV)的囊膜蛋白。相似性分析发现, VP110与昆虫DNA病毒经口感染关键因子PIF2具同源性,且同源区主要位于N端150~600aa。同时两者均在N端前端含一个跨膜区。为了研究VP110 N端保守区的功能,将vp110 N端基因( Svp110,450~1830 bp)克隆至pET-16b及pGEX-4T1原核表达载体中,同时分别在大肠埃希菌BL21(DE3)、Rosetta 2菌株中优化表达条件,诱导VP110 N端蛋白( sVP110)表达。实验结果表明,重组质粒pET-16b-Svp110在37℃1 mmol/L IPTG条件下可得到表达,但16℃下表达量很低。而重组质粒pGEX-4T1-Svp110则在16℃下得到较高表达。同时, Rosetta 2菌株的表达量高于BL21(DE3)。该研究表明Rosetta 2菌株更适合作为WSSV结构蛋白的表达,同时VP110在不同载体中的表达受温度的影响。VP110 N端蛋白的表达为VP110的功能研究打下了基础。
对虾白斑综合征病毒(WSSV)、VP110、原核表达
Q786;S945.4(基因工程(遗传工程))
教育部高等学校博士点基金项目20133104110006;上海市教委项目14ZZ144;上海市科委工程中心建设项目11DZ2280300
2015-05-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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