1种用于检测抑制基因功能的酵母株系的建立

摘要：

酵母被广泛用于分子生物学中基因功能的检测.为扩大酵母株系UCC419在抑制基因活性检测方面的应用,本研究通过向UCC419株系中导入用特殊引物扩增出的包含标记基因TRP1的PCR片段,利用同源重组将UCC419中的筛选标记基因LEU2敲除,并同时插入TRP1,新建立的株系命名为UCC419m(m:modified).UCC419m为TRP1筛选、leu2突变型菌株,其它基因型均同UCC419.给UCC419m中转入携带LEU2的质粒pDEST32检测是否能恢复其表现型,同时转入不携带LEU2的质粒pDEST22作为阴性对照,将转化子在不含LEU2与URA3的培养基中培养,结果显示,携带LEU2质粒pDEST32的转化子能够在LEU2与URA3缺陷型培养基上正常生长,而不携带LEU2质粒pDEST22的转化子不能生长.本研究结果表明,成功建立了一种适用于基于Invitrogen载体的抑制基因活性检测或从文库中筛选抑制基因的酵母菌株.

关键词：酵母、双交换插入失活、转化

所属期刊栏目：31

分类号：Q-933(生物资源调查)

资助基金：Chinese Scholarship Council and Startup Foundation for Doctors of Tibet Agricultural and Animal Husbandry College.This study was performed in Dr.Zhongchi Liu' s lab,Dept.of Cell Biology & Molecular Genetics,University of Maryland,USA

在线出版日期：2011-10-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：57-60