家蚕细小病毒样病毒(BmPLV-Z)VD1ORF4的原核表达

摘要：

对家蚕细小病毒样病毒(BmPLV-Z)VD1 ORF4理论上编码的氨基酸序列进行Blast搜索,结果表明其与DNA聚合酶B家族同源.通过PCR扩增其DNA聚合酶同源区(1077 bp),将扩增的目的DNA片段与原核表达载体pET30a进行连接,通过不同浓度的IPTG对捕获pET30a-10877 bp重组质粒的大肠埃希菌进行诱导,对诱导产物进行SDS-PAGE电泳,结果表明其聚合酶同源区获得了表达;Western blot分析进一步确证诱导蛋白为带有6个组氨酸的融合蛋白.将割胶获得的目的蛋白免疫昆明小鼠制备其多抗,以纯化后的抗血清对 VD1 ORF4全长序列和部分序列在原核中的漏扫描表达情况进行研究,SDS-PAGE和Western blot结果表明VD1 ORF4全长序列和部分序列的原核表达产物均一,都只有一条特异的目的蛋白带,说明了VD1 ORF4序列在原核表达系统中没有漏扫描表达的蛋白.

关键词：家蚕细小病毒样病毒、VD1、原核表达、抗体制备、漏扫描

所属期刊栏目：31

分类号：Q939.4(微生物学)

资助基金：国家自然科学基金31000080,30871826;校科研启动基金09JDG057

在线出版日期：2011-10-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：35-40