10.3969/j.issn.1005-7021.2011.03.002
粘红酵母乙酰辅酶A羧化酶(ACC)基因的克隆及CT功能域基因的原核表达
利用简并PCR结合染色体步移法首次克隆获得粘红酵母乙酰辅酶A羧化酶(ACC)基因的全长序列信息.序列分析表明,该基因包含2个内含子,分别位于42~147 bp和315~677 bp处,编码区域总长为6 801bp,推导的氨基酸序列进行二级结构分析具备乙酰辅酶A羧化酶典型的3个功能域:生物素羧化酶(BC)、生物素羧基载体蛋白(BCCP)和羧基转移酶(CT).克隆该基因的CT功能域基因,连接到原核表达载体pET-28a上,在Escherichia coli BL21(DE3)中成功表达,利用Ni-NTA树脂柱纯化获得CT的可溶性重组蛋白,浓度为1.8mg/mL,为研究ACC的功能和针对CT作用的除草亮机理研究提供了有价值的材料.
粘红酵母、ACC基因、克隆、CT功能域、原核表达
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Q78(基因工程(遗传工程))
国家转基因生物新品种培育重大专项课题2009ZX08009-120B
2011-10-13(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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