鸟苷酸结合蛋白5在牛分枝杆菌诱导巨噬细胞极化过程中的作用

摘要：

[背景]牛分枝杆菌(Mycobacterium bovis)是重要的人畜共患病原体,严重危害公共卫生安全.巨噬细胞是牛分枝杆菌感染的主要效应细胞,M1型巨噬细胞极化对于宿主免疫防御M.bovis感染至关重要.[目的]探讨鸟苷酸结合蛋白5(guanylate-binding protein 5,GBP5)对M.bovis感染的小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7细胞M1、M2型极化的影响,以及GBP5在M.bovis感染中的作用.[方法]通过前期转录组学数据分析筛选出差异基因GBP5,通过体内、体外验证M.bovis感染后的GBP5的表达水平.小干扰RNA下调细胞内GBP5表达,分别利用RT-qPCR、Western blotting和流式细胞术检测M1、M2型巨噬细胞表面标志物表达变化;平板菌落计数法检测GBP5对M.bovis在巨噬细胞中复制的影响;双荧光素酶报告基因试验检测GBP5对信号转导及转录激活蛋白3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)转录调控;Western blotting 检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)抑制后STAT3的磷酸化情况.[结果]GBP5在M.bovis感染的RAW264.7细胞和C57BL/6小鼠组织中表达增加;下调GBP5后细胞内细菌CFU在感染后不同时间点均显著增加,ROS释放减少,M1型巨噬细胞表面标志物表达减少,但是对M2型巨噬细胞无显著影响;下调GBP5后抑制了STAT3的转录启动.ROS的产生抑制了STAT3的磷酸化.[结论]GBP5促进ROS的产生,调控ROS/STAT3通路,促进巨噬细胞向M1型极化,从而抑制细胞内牛分枝杆菌的存活.

关键词：鸟苷酸结合蛋白5、巨噬细胞、极化、牛分枝杆菌

所属期刊栏目：50

分类号：R783.5;R392.11;R541.4

资助基金：国家重点研发计划2021YFD1800503

在线出版日期：2023-04-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共16页

页码：1163-1178