10.13344/j.microbiol.china.220127
转录组分析罗伯茨绿僵菌精胺合成酶MrSPS介导真菌血腔定殖功能
[背景]精胺在植物应对逆境胁迫、动物抵抗疲劳和衰老、真菌生长代谢等过程中发挥重要作用,但目前在昆虫病原真菌中的研究未见报道.[目的]在分子水平上探究罗伯茨绿僵菌精胺合成关键酶——精胺合成酶在昆虫血腔定殖中的作用机制.[方法]显微注射法测定Mrsps敲除株△Mrsps的致病力变化,并观察血腔中△Mrsps生长状态;收集△Mrsps和野生型WT注射侵染30 h后的大蜡螟血淋巴进行转录组测序,分别与罗伯茨绿僵菌和大蜡螟参考基因组进行比对分析,并结合定量PCR进行验证.[结果]与WT和回补株△Mrsps-cp相比较,△Mrsps致病力显著下降,而且随着注射浓度的降低,△Mrsps致病力下降越显著.侵染36 h后WT和△Mrsps孢子都能正常萌发且开始以类酵母状态生长,60h后,相较于WT,△Mrsps的生长繁殖数量较少.转录组共检测到3 202个罗伯茨绿僵菌基因,其中1 769个基因在△Mrsps中表达上调,922个基因表达下调;差异表达基因涉及碳水化合物代谢、运输、分解代谢、翻译和氨基酸代谢等多条途径;筛选出28个血腔致病相关基因全部在△Mrsps中表达下调;定量PCR检测发现在整个血腔定殖阶段免疫逃避蛋白Mcll基因和血腔定殖Colonization of hemocoel 1基因在WT和△Mrsps-cp中的表达量高于△Mrsps.共检测到13 249个大蜡螟基因,其中4 026个差异表达基因;KEGG注释分析显示大量差异表达基因富集到内分泌系统和免疫系统等途径;深入分析发现22个差异表达基因归属于Toll和Imd信号通路,其中18个基因在△Mrsps侵染的大蜡螟中表达上调,表明△Mrsps侵染大蜡螟过程中更易引起免疫系统的激活.[结论]揭示了 Mrsps在罗伯茨绿僵菌血腔定殖阶段作用的分子机制,为进一步揭示精胺在真菌中的作用机理提供了理论基础.
转录组、罗伯茨绿僵菌、精胺合成酶、血腔定殖
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S433;S882;Q966
国家自然科学基金;安徽省大学生创新训练计划项目;安徽农业大学大学生创新训练计划
2022-11-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共16页
4118-4133
