N-糖链加工影响里氏木霉形态发生并提高木质纤维素降解能力

摘要：

[背景]烟曲霉α-1,2-甘露糖苷酶MsdS在高尔基体中将N-糖链Man8G1cNAc2加工为成熟分泌糖蛋白的糖型Man6G1cNAc2,有研究表明MsdS与烟曲霉的形态发生、细胞壁合成及蛋白质分泌密切相关;与烟曲霉不同的是,里氏木霉的成熟分泌糖蛋白上的N-糖链结构为Man8G1cNAc2,细胞却能正常生长,说明丝状真菌N-糖链的加工具有物种特异性,但其生物学意义不明.[目的]为研究N-糖链加工对里氏木霉细胞生长及蛋白质分泌的影响,本研究将烟曲霉MsdS转入里氏木霉中以改变其成熟分泌糖蛋白的糖型.[方法]构建带有烟曲霉msdS基因的重组质粒并转入里氏木霉中,获得msdS表达菌株Tr-MsdS,分析Tr-MsdS菌株的生长表型、N-糖组、蛋白质分泌途径和纤维素酶活性的变化.[结果]在里氏木霉msdS表达菌株Tr-MsdS中,分泌糖蛋白的主要糖型由出发株的Man8G1cNAc2转变为Man6G1cNAc2,细胞壁组分发生变化,但细胞壁完整性未受影响;与出发株相比,Tr-MsdS菌株产孢、出芽及分枝增多;另外,MsdS的表达还影响蛋白质分泌,在50℃时降解纤维素和β-葡聚糖的能力分别提高9.9％和32.2％.[结论]研究结果表明,N-糖链的加工可影响里氏木霉蛋白质,尤其是纤维素酶的分泌,干扰N-糖链加工可能是提高里氏木酶纤维素酶产量的新策略.

关键词：α-甘露糖苷酶;N-糖链加工;里氏木霉;纤维素酶;蛋白质分泌

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资助基金：National Natural Science Foundation of China;Bagui Scholar Program Fund of Giuangxi Zhuang Autonomous Region;广西八桂学者项目

在线出版日期：2021-12-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共17页

页码：3432-3448