基因重组大肠杆菌表达血红素加氧酶-1及培养条件优化

摘要：

[背景]血红素加氧酶-1 (HO-1)具有抗氧化应激、抗凋亡和抗纤维化等多种生理效应,有望成为一种新型药物应用于临床疾病的治疗.[目的]构建表达HO-1的基因重组大肠杆菌(Escherichia coli),并优化其表达培养条件,实现HO-1高产率的表达.[方法]PCR法克隆集胞藻(Synechocystis sp.) PCC 6803的HO-1基因(ho1),构建重组质粒pET-28a-hol,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,单因素实验优化表达培养基的种类、诱导剂添加时间、诱导培养时间、诱导剂浓度和诱导培养温度.[结果]构建了表达HO-1的基因重组大肠杆菌BL21 (DE3)/pET-28a-ho1菌株,用甘油(GY)培养基培养至菌体浓度OD600约为0.8时,加入终浓度为0.1 mmol/L的IPTG诱导,30℃诱导培养6h,HO-1的表达量最高,Ni-NTA柱分离纯化得到的HO-1收率占细胞总蛋白的10.9％.[结论]获得了可溶性表达HO-1的基因重组大肠杆菌及其较佳的培养条件,为进一步研究集胞藻来源的HO-1的酶学性质和应用奠定了基础.

关键词：血红素加氧酶、原核表达、大肠杆菌、表达条件优化

所属期刊栏目：46

资助基金：浙江省公益技术应用研究项目2016C33167

在线出版日期：2019-04-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：541-547