10.13344/j.microbiol.china.170858
基于反转录-环介导等温扩增技术检测沙门氏菌
[背景]沙门氏菌是世界上最常见的食源性致病菌之一,全球每年沙门氏菌中毒事件居细菌性中毒事件首位.[目的]建立反转录-环介导等温扩增(Reverse transcriptase loop-mediated isothermal amplification,RT-LAMP)技术特异性检测沙门氏菌.[方法]针对沙门氏菌特异保守invA基因设计多组引物,通过对引物筛选和反应条件优化,建立了检测沙门氏菌的实时荧光RT-LAMP方法.利用沙门氏菌及其人工污染脱脂乳样品,研究了方法的特异性和灵敏性,并与RT-PCR (Reverse transcription polymerase chain)方法的灵敏度进行比较.[结果]等温65℃条件下30 min内可完成RT-LAMP反应.利用该方法检测5株沙门氏菌均为阳性,其余21种检测菌株为阴性.在人工污染脱脂乳样品的检测中,灵敏度达到60 CFU/g,比RT-PCR方法高100倍.[结论]建立的实时荧光RT-LAMP方法将为沙门氏菌现场快速检测提供有力手段.
反转录-环介导、等温扩增、沙门氏菌、检测、脱脂乳
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2018-11-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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