幽门螺杆菌东、西方株CagA的序列差异及其对胃癌细胞生长与凋亡的影响

摘要：

[背景]幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H. pylori)是胃癌的主要致病因素,其分泌的细胞毒素相关基因A蛋白(Cytotoxin associated gene A,CagA)是目前已知唯一能被H. pylori注入胃上皮细胞并模拟细胞内蛋白发挥作用的癌蛋白,参与胃癌的发生发展.[目的]比较H. pylori东亚株和西方株CagA结构差异,初步探讨H.pylori-CagA对胃癌细胞增殖与凋亡的影响.[方法]对H. pylori东亚株和西方株CagA的核酸及氨基酸序列进行生物信息学分析,构建含东亚株和西方株cagA基因的真核表达载体,转染胃癌细胞AGS,用Western blot法检测CagA蛋白的表达,用CCK8法测定细胞的生长曲线,流式细胞术检测细胞凋亡.[结果]生物信息学分析发现H.pylori东亚、西方菌株CagA的核酸序列和氨基酸序列均存在特征性差异.构建了含东亚、西方菌株cagA基因的表达载体[命名为GZ7/cagA(东亚株)和26695/cagA (西方株)].与空载体组比较,GZ7/cagA和26695/cαgA转染组均表达CagA蛋白,两组比较表达量无显著性差异,GZ7/cagA转染组细胞生长显著增加,而26695/cagA转染组细胞生长显著降低(P＜0.05).GZ7/cagA转染组、26695/cagA转染组细胞的凋亡率分别为7.23士0.96及9.17±1.40,均高于空载体组(5.03±0.63),差异有统计学意义(P＜0.05).[结论]东亚株与西方株CagA之间有结构和功能的差异,东亚株CagA能促进细胞增殖,而西方株CagA却抑制细胞增殖,但两者均能促进细胞凋亡.

关键词：幽门螺杆菌、CagA、胃癌、细胞增殖、细胞凋亡

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资助基金：国家自然科学基金31560326，31660031；贵州省科技合作计划项目黔科合LH字[2015]7360；贵州省卫计委科技基金gzwjkj2015-1-010;National Natural Science Foundation of China31560326, 31660031;Science and Technology Planning Project of Guizhou ProvinceLH[2015]7360;Science and Technology Foundation of Guizhou Provincial Health and Family Planning Commissiongzwjkj2015-1-010

在线出版日期：2018-08-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：848-855