沙眼衣原体GlgA蛋白表达和分泌的调控机制

摘要：

[背景]沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)的分泌蛋白在Ct与宿主细胞的相互作用、感染发育周期及致病过程中发挥着至关重要的作用.GlgA蛋白是课题组前期研究发现的一种新的Ct分泌蛋白,其表达和分泌的具体机制及作用还不清楚.[目的]寻找调控Ct GlgA蛋白表达和分泌的分子机制,为后续Ct致病机制研究提供实验基础和新思路.[方法]采用SignalP 4.1软件对GlgA蛋白N端进行信号肽预测分析,并用细菌分泌蛋白特异性阻断剂C16和C1化合物分别或同时处理Ct感染的HeLa细胞,观察阻断Ⅱ型、Ⅲ型分泌途径对GlgA蛋白分泌的影响;经新生霉素处理、噬斑筛选及穿梭质粒转染技术,构建Ct质粒缺失株和缺失互补株,并鉴定质粒编码基因在两种菌株的缺失及表达情况;间接免疫荧光法观察质粒缺失对GlgA表达和分泌的影响.[结果]GlgA蛋白N端无信号肽序列,细菌Ⅱ型、Ⅲ型分泌途径特异性阻断剂C16和C1化合物不能阻断GlgA的胞浆分泌;Ct质粒缺失株CTD1的质粒编码基因pgp7丢失,且质粒编码蛋白Pgp3及基因组编码蛋白GlgA的表达和分泌现象均消失;Ct缺失互补株CTD1-pGFP::SW2重新获得pgp7基因,并恢复Pgp3蛋白和GlgA的表达和分泌.[结论]初步证实Ct糖原合酶GlgA蛋白的表达和分泌不依赖细菌Ⅱ型和Ⅲ型分泌途径,而且与衣原体质粒密切相关.

关键词：沙眼衣原体、糖原合酶GlgA、分泌蛋白、质粒缺失株

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资助基金：National Natural Science Foundation of China81471969,81202374,81572011;Hunan Provincial Key Laboratory for Special Pathogens Prevention and Control2014-5;Hunan Provincial Cooperative Innovation Center for Molecular Target New Drug Study 2015-8国家自然科学基金81471969,81202374,81572011;湖南省重点实验室特殊病原体防控项目2014-5;湖南省高等学校“分子靶标新药研究”协同创新中心资助项目2015-8

在线出版日期：2018-04-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：428-435