布鲁氏菌对RAW264.7细胞内质网应激与细胞因子分泌的影响

摘要：

[目的]布鲁氏菌与宿主相互作用的分子机制是目前的研究热点之一,布鲁氏菌通过形成来自于内质网的布氏小体而在巨噬细胞内生存和增殖,其机制目前尚不清楚,宿主细胞内质网应激反应对病原感染和炎症的调控密切相关.揭示内质网应激反应在布鲁氏菌感染巨噬细胞中的作用以及布鲁氏菌感染对巨噬细胞分泌免疫因子的影响.[方法]构建布鲁氏菌感染RAW264.7模型,在感染后不同时间收集细胞,通过实时荧光定量PCR检测细胞内质网应激反应标志分子GRP78和CHOP,以及TNF-α、IL-1β和IL-6在mRNA水平的变化;通过Western blot和ELISA分别检测其蛋白水平的变化.[结果]布鲁氏茵感染RAW264.7细胞的最佳感染复数MOI为100∶1;证明在布鲁氏菌感染4-6 h,巨噬细胞可杀伤侵入的布鲁氏菌,之后存活的细菌可在细胞内增殖;感染后24 h出现细胞凋亡,48 h出现大量细胞坏死.布鲁氏茵感染可激活RAW264.7细胞的内质网应激反应,促进GRP78的表达,同时,抑制免疫因子的分泌.[结论]内质网应激反应参与了RAW264.7对布鲁氏菌感染的调节.

关键词：布鲁氏菌S2株、RAW264.7细胞、内质网应激、GRP78、CHOP、细胞因子

所属期刊栏目：44

分类号：R73;R77

资助基金：National Natural Science Foundation of China31672584;The Sci-tech Innovation Project of Shaanxi Province No.2016TZC-N-13-5国家自然科学基金项目31672584;陕西省科技统筹创新工程计划项目2016TZC-N-13-5

在线出版日期：2018-01-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：2896-2904