鸡源和猪源乳杆菌胆盐水解酶的表达及酶学性质比较

摘要：

[目的]随着抗生素生长促进剂(AGPs)在动物饲料中逐步禁止使用,AGPs替代物的研究成为热点.由于胆盐水解酶(BSH)在脂类代谢中的关键作用,成为AGPs替代物研究的一个重要方向.在原核表达和纯化的基础上鉴定鸡源和猪源乳杆菌BSH在酶学性质方面的差异性.[方法]分别对鸡源胆盐水解酶(BSHc)和猪源胆盐水解酶(BSHp)基因进行原核表达和蛋白纯化,通过测定对6种甘氨结合胆盐和牛磺结合胆盐的水解效率获得两种酶的酶学动力学性质,进而测定了温度、pH和金属离子对酶活力的影响.[结果]BSHc和BSHp对甘氨结合胆盐的水解效率高于牛磺结合胆盐,BSHc对甘氨结合胆盐的水解效率较BSHp稍高;BSHc和BSHp的最适酶解温度分别为45℃和42℃;BSHc和BSHp的最适反应pH分别为6.0和5.4;含有Cu2+、Fe3+、Mn2+和Zn2+的金属盐对BSHc和BSHp的酶活力均具有不同程度的抑制作用,特别是Cu2+和Fe3+抑制作用比较强;含有Na+、K+、Mg2+和Ca2+的金属盐对BSHc和BSHp酶活力的抑制作用相对较弱或无抑制作用,但KIO3对BSHc和BSHp酶活力具有强抑制作用,KI和CaCl2对BSHp酶活力也具有较强的抑制作用.[结论]原核表达和纯化的BSHc和BSHp对甘氨结合胆盐的水解效率高于牛磺结合胆盐,BSHc的最适酶解温度和pH稍高于BSHp,Cu2+、Fe3+、Mn2+和Zn2+等金属离子对BSHc和BSHp酶活力具有明显抑制作用,试验结果为鉴定BSH抑制物进而研制AGPs替代物奠定了基础.

关键词：胆盐水解酶、酶活力、温度、pH、金属离子

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分类号：S85;TS2

资助基金：National Natural Science Foundation of China31572527;The Special Program on Science and Technology Innovation Capacity Building of BAAFS No.KJCX20150703,KJCX20161503国家自然科学基金项目31572527;北京市农林科学院科技创新能力建设专项项目KJCX20150703,KJCX20161503

在线出版日期：2018-01-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：2871-2877