Burkholderia sp.IDO3中靛蓝合成基因的克隆表达及其合成特性

摘要：

[目的]克隆和表达靛蓝合成基因,并将其用于靛蓝合成研究.[方法]对菌株Burkholderia sp.IDO3中靛蓝合成基因进行克隆和大肠杆菌异源表达,构建能合成蓝色色素的基因工程菌.利用液相色谱和质谱对产物进行分析,采用单因素法对培养温度、转速、培养基成分等进行优化,并考察优化条件下的靛蓝合成曲线.[结果]构建了一株重组大肠杆菌E.coli IND_AB,该菌株能够在LB培养基生长的过程中合成蓝色色素,产物分析表明该色素为靛蓝;菌株IND AB在30℃和150 r/min条件下能在LB培养基中合成22.9 mg/L靛蓝,优化培养条件后产量达到25.4 mg/L;优化LB培养基各组分浓度后产量可提高到35.1 mg/L;外加50.0 mg/L吲哚或0.1 g/L色氨酸后靛蓝产量可分别提高到57.7 mg/L和64.4 mg/L,相比初始产量提高了152.0％和181.2％;靛蓝合成曲线表明在添加吲哚或色氨酸的培养基中,菌株INDAB前6h没有靛蓝生成,6-15h为靛蓝合成加速期,18h达到产量平衡.[结论]重组大肠杆菌1NDAB可用于生物合成高纯度靛蓝,为靛蓝的微生物合成提供了有效的基因资源.

关键词：靛蓝合成基因、吲哚、色氨酸、微生物合成

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分类号：R37;R39

资助基金：National Natural Science Foundation of China51508068;Program for New Century Excellent Talents in University of ChinaNCET-13-0077;Fundamental Research Funds for the Central Universities of ChinaDUT14YQ107;Program of Introducing Talents of Discipline to Universities of China No.B13012国家自然科学基金项目51508068;新世纪优秀人才支持计划项目NCET-13-0077;中央高校基本科研业务费专项项目DUT14YQ107;高等学校学科创新引智计划资助项目B13012

在线出版日期：2017-12-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：2634-2643