玉米联合固氮菌Kosakonia radicincitans GXGL-4A的分离鉴定与固氮特性研究

摘要：

[目的]固氮微生物是生物固氮的主体,其菌种的选育更是生物固氮研究的基础.本实验室分离鉴定出一株新的固氮菌,并对其固氮相关活性进行初步研究.[方法]固氮菌采用Ashby无氮培养基进行分离纯化.通过形态特征分析、生理生化特征分析、16S rRNA基因序列分析和基因组扫描对固氮菌进行鉴定.利用靛酚蓝-分光光度法检测固氮菌的泌铵能力.固氮酶活性的测定使用乙炔还原法.[结果]从玉米根部分离到一株固氮菌株GXGL-4A,菌体短杆状,大小约为1.5 μm×0.5 μm,单个或常见2个菌体细胞串联在一起,革兰氏染色结果为阴性.16S rRNA基因序列分析结果表明该菌株与Kosakonia oryzae F08A1d 16S rRNA基因序列有95％的相似性,结合形态特征、生理生化特征和基因组扫描,将其命名为K.radicincitans GXGL-4A.对其进行固氮基因nifH的检测,经PCR扩增得到预期的296 bp条带;采用靛酚蓝-分光光度法,测得发酵液中铵态氮含量为2.5 mg/L,表明该菌株具有较好的泌铵能力.乙炔还原法测其固氮酶活性,以乙烯生产量表示,结果显示GXGL-4A菌株在无氮培养基上能够有效地还原乙炔,达到232.94 nmol C2H4/(mL·h).[结论]菌株GXGL-4A是一株可较好地分泌铵的新的固氮菌,具有很好的研究价值.

关键词：玉米、固氮菌、分离鉴定、Kosakonia radicincitans GXGL-4A

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资助基金：国家重点基础研究发展规划项目973计划No.2015CB755702National Basic Research Program of China 973 Program No.2015CB755702

在线出版日期：2016-12-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：2456-2463