重组鹅β-防御素12蛋白的原核表达及生物学特性

摘要：

[目的]研究重组鹅β-防御素12蛋白的原核表达并探究其生物学特性.[方法]采用His标签蛋白原核表达系统,将鹅防御素12 (AvBD12)基因亚克隆到表达载体pProEX-HTa上,构建重组表达质粒.将重组表达质粒转化到大肠杆菌Rosseta感受态中,用IPTG进行诱导表达,并对该重组蛋白进行纯化.进一步采用菌落计数法测定其体外抗菌活性和盐离子稳定性.[结果]经Tricine-SDS-PAGE电泳分析,诱导表达的鹅AvBD 12重组蛋白分子量约为12 kD,大部分以包涵体形式存在.该重组蛋白对大肠杆菌、鸡白痢沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、四联球菌、枯草芽孢杆菌均具有抗菌活性,高浓度盐离子显著抑制重组蛋白的抗菌活性.此外,该重组蛋白对鸡红细胞没有溶血活性.[结论]该重组蛋白具有广谱抗菌活性,高浓度盐离子显著降低其抗菌活性,且该重组蛋白不具有溶解鸡红细胞的活性.

关键词：鹅β-防御素12、重组蛋白、抗菌活性

所属期刊栏目：43

资助基金：教育部博士点基金项目No.20122325110016;哈尔滨市科技创新人才研究专项资金项目No.2013RFXXJ019;黑龙江省应用技术研究与开发计划项目No.PC13S02,Specialized Research Fund for the Doctoral Program of Higher Education No.20122325110016;Specialized Research Fund for the Science and Technological Innovation Talent of Harbin No.2013RFXXJ019;Research Program for Applied Technology of Heilongjiang Province No.PC13S02

在线出版日期：2016-10-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1973-1979