苏云金芽胞杆菌Sigma K在大肠杆菌中的表达与纯化

摘要：

[目的]在大肠杆菌中表达纯化苏云金芽胞杆菌HD73的转录调控因子SigmaK(σK).[方法]PCR扩增出苏云金芽胞杆菌HD73中sigK基因的ORF (Open reading frame)装载到带有His标签的表达载体pET21b上,转入到表达菌株BL21(DE3)中获得重组菌株BL21(pETsigK),通过SDS-PAGE、镍柱亲和纯化、阴离子交换纯化和凝胶迁移实验(EMSA)等方法对Sigma K蛋白进行提取、纯化和生物活性分析.[结果]正确表达出大小约为27 kD的His-Sigma K蛋白,并获得了纯化的蛋白.EMSA结果表明纯化的His-Sigma K蛋白可以与受其控制的crylAc基因启动子结合.[结论]表达和纯化了His-Sigma K蛋白,His-Sigma K具有与受其控制的启动子结合的功能.

关键词：苏云金芽胞杆菌、Sigma K蛋白、生物活性、转录调控

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资助基金：National Natural Science Foundation of China No.31270111,31300085国家自然科学基金项目No.31270111,31300085

在线出版日期：2016-03-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：69-75