弗氏柠檬酸菌1,3-丙二醇合成的代谢工程研究

摘要：

[目的]研究弗氏柠檬酸菌(Citrobacter freundii) 1,3-丙二醇合成的代谢过程.[方法]构建甘油脱氢酶基因GSR-lacZ、1,3-丙二醇氧化还原酶基因PDO-lacZ和甘油脱水酶基因GL-lacZ等报告基因.在此基础上,构建3个相应的转座子突变文库.[结果]筛选到6株突变子,其相应关键酶表达水平提高1-11倍,1,3-丙二醇产量提高幅度为3％-50％.对转座子插入位点分析显示,5株突变子插入位点均为β-内酰胺酶(CKO 02592)编码基因,1株突变子插入位点为二氢硫辛酰胺基转移酶(CKO_02433)编码基因.进一步分析发现,β-内酰胺酶基因突变显著提高甘油脱水酶和甘油脱氢酶的表达水平,而1,3-丙二醇氧化还原酶表达水平没有变化;二氢硫辛酰胺基转移酶基因突变显著提高1,3-丙二醇氧化还原酶表达水平,其他两种关键酶基因表达水平不变.[结论]β-内酰胺酶和二氢硫辛酰胺基转移酶基因能够分别影响1,3-丙二醇合成代谢途径关键酶的表达,为构建工程菌株打下基础.

关键词：转录融合报告基因、转座子突变文库、弗氏柠檬酸菌、1、3-丙二醇

所属期刊栏目：42

资助基金：国家自然科学基金项目No.31370205

在线出版日期：2015-04-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：451-459