一株产G418单组分工程菌的构建

摘要：

[目的]定向改造庆大霉素产生菌绛红小单孢菌G1008,获得产G418单组分工程菌.[方法]以温敏型穿梭质粒pKC1139为载体,构建敲除基因genQ*重组质粒pQB303,通过接合转移,导入绛红小单孢菌G1008中,影印筛选和PCR鉴定genQ*框内缺失突变菌,利用TLC和MS分析其代谢产物组分.[结果]获得一株genQ*缺失工程菌Micromonospora purpurea GQ 175,其代谢产物为G418单组分,生物效价达828 mg/L,与出发菌G1008的产抗能力相当.[结论]工程菌GQ175产G418单组分,具有很好的工业开发价值.同时,证明绛红小单孢菌G1008中,庆大霉素C-6'脱氢酶基因为genQ*,且无其他同功酶基因.

关键词：绛红小单孢菌、G418、基因敲除、genQ*

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资助基金：国家自然科学基金项目No.31070093;国家“重大新药创制”科技重大专项项目No.2012ZX09201101-008

在线出版日期：2015-03-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：307-314