ABC转运蛋白基因slnTⅠ和slnTⅡ与盐霉素生物合成的相关性

摘要：

[目的]slnTⅠ和slnTⅡ是盐霉素生物合成基因簇中可能的两个转运蛋白基因,根据生物信息学的分析推测它们属于ABC转运蛋白家族.其中,slnTⅠ编码ABC转运蛋白的ATP结合亚基,slnTⅡ编码ABC转运蛋白的跨膜亚基,推测它们可能与盐霉素的外排有关.通过slnTⅠ和slnTⅡ的基因中断与超量表达研究它们对盐霉素生物合成产量和抗性的影响.[方法]利用REDIRECT?技术,在盐霉素产生菌白色链霉菌XM211中分别构建了slnTⅠ和sln TⅡ的基因置换突变株LJ01和LJ02,并通过基因回补对突变株进行了验证.利用整合型表达载体pPM927在白色链霉菌XM211中对slnTⅠ和slnTⅡ进行串联超量表达.将slnTⅠ和slnTⅡ导入变铅青链霉菌1326中进行异源表达,通过液体培养实验检测衍生菌株对盐霉素的抗性.[结果]相比出发菌株XM211,突变株LJ01中盐霉素的产量下降了27.2％,LJ02下降了45.4％,LJ01和LJ02中结构基因slnA3和调控基因slnR的转录水平都有明显降低.超量表达菌株LJ03中盐霉素的产量提高了14.6％,转录结果显示LJ03中不仅sln TⅠ和slnTⅡ自身转录水平有大幅提高,而且slnA3和slnR转录水平也显著升高.抗性检测结果表明,异源表达菌株变铅青链霉菌LJ04对盐霉素的抗性水平略有提高.[结论]slnTⅠ和slnTⅡ是与盐霉素生物合成和外排有关的ABC转运蛋白基因,但并不是白色链霉菌XM211对盐霉素的主要抗性基因.

关键词：盐霉素、ABC转运蛋白、基因置换、超量表达、抗性

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资助基金：国家自然科学基金项目31070070

在线出版日期：2014-03-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：58-66