稻曲病菌UV-2菌株细菌人工染色体文库构建及分析

摘要：

[目的]稻曲病(Rice false smut)是由稻曲病菌[Villosiclava virens (Cooke) Tak.]引起的严重危害水稻的真菌病害.构建稻曲病菌UV-2的大片段DNA细菌人工染色体(Bacterial artificial chromosome,BAC)文库,为致病相关基因的鉴定及在图位克隆、比较基因组学等方面的研究奠定基础.[方法]以幼嫩菌丝为材料制备大分子基因组DNA包埋块,用Hind Ⅲ部分酶解后经脉冲凝胶电泳筛选,回收大片段DNA并与plndigoBAC536-S载体连接,连接产物转化大肠杆菌菌株DH10B Tl Phage-Resistant细胞后进行蓝白斑筛选,白色菌落捡入384孔板置于-80℃低温保存.[结果]成功构建UV-2菌株的高质量、高覆盖度的BAC文库,该文库共含10 368个克隆,平均插入片段为124.4 kb,空载率小于1‰约覆盖该菌基因组的36.8倍.[结论]克服了真菌大分子基因组DNA制备难控制的技术难题,建立了首个稻曲病菌的BAC文库.该文库已作为一种公共基因组资源向研究者开放(http:∥GResource.hzau.edu.cn).

关键词：大分子DNA、细菌人工染色体、水稻、稻曲病、稻曲病菌

所属期刊栏目：40

资助基金：农业部公益性行业专项项目200903039-3

在线出版日期：2013-11-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1715-1722