产丁二酸谷氨酸棒状杆菌基因缺失代谢工程菌株的构建
[目的]提高谷氨酸棒状杆菌(Corynebacterium glutamicum) ATCC13032厌氧条件下的丁二酸产量,并降低发酵产物中副产物的含量.[方法]以谷氨酸棒状杆菌(Corynebacterium glutamicum)ATCC13032为出发菌,首先敲除乳酸形成的关键酶乳酸脱氢酶基因(ldh),构建ldh缺失株谷氨酸棒状杆菌ATCC13032△ldh;然后以缺失株谷氨酸棒状杆菌ATCC13032△ldh为出发菌,敲除该菌的丙酮酸脱氢酶系的E1p酶基因(aceE),构建一株双缺失突变菌株谷氨酸棒状杆菌ATCC13032△ldh△aceE.[结果]与供试菌比较,谷氨酸棒状杆菌ATCC13032△ldh的丁二酸产量和转化率分别提高了94.9%和32%,并且主要的副产物乳酸产量由出发菌产量的63.5 g/L降低到很微量的程度.丙酮酸脱氢酶的失活并不能完全消除副产物乙酸的形成,但乙酸的产量较ATCC13032△ldh降低了37.9%,丁二酸的产量略有提高.[结论]该重组菌具有较强的丁二酸生产工业化潜力,并且该研究方法为微生物代谢育种提供参考.
谷氨酸棒状杆菌、丁二酸、基因敲除、厌氧转化
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2013-07-05(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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