铜绿假单胞菌噬菌体PaP4的分离与鉴定
[目的]鉴定一株新分离的铜绿假单胞菌噬菌体PaP4的生物学特性.[方法]双层琼脂培养法制备PaP4的单个噬斑,观察噬斑特点；用聚乙二醇8000浓缩PaP4颗粒后,再用氯化铯密度梯度离心纯化；用透射电子显微镜观察磷钨酸负染色的PaP4颗粒；提取PaP4基因组核酸,通过限制性内切酶图谱分析其核酸类型；按照感染复数(MOI)分别为0.000 1、0.001、0.01、0.1、1和10加入噬菌体纯培养液和宿主菌,充分裂解细菌后,测定噬菌体滴度；以MOI=10的比例加入噬菌体及宿主菌,进行一步生长实验,绘制一步生长曲线.[结果]PaP4的噬斑直径约3 mm-5 mm,圆形透明边缘清晰；PaP4噬菌体呈多面体立体对称的头部,直径约50 nm,有一个约30 nm的短尾；限制性酶切实验表明PaP4基因组为双链DNA;当MOI为0.001时PaP4感染其宿主菌产生的子代噬菌体滴度最高；用一步生长曲线描绘了其生长特性.[结论]PaP4属dsDNA短尾科裂解性噬菌体；最佳感染复数是0.001;由一步生长曲线得出感染宿主菌的潜伏期是25 min,裂解期是20 min,平均裂解量是150.
铜绿假单胞菌噬菌体、裂解性噬菌体、短尾病毒科、最佳感染复数、一步生长曲线
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国家自然科学基金项目31070153
2013-05-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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