大豆疫霉菌(Phytophthora sojae)无毒基因Avr1a、Avr1k及Avr3a的分子鉴定

摘要：

[目的]为大豆疫霉菌(Phytophthora sojae)无毒基因Avr1a、Avr1k和Avr3a快速分子检测提供方法,也为P.sojae其它无毒基因的快速分子检测研究提供依据.[方法]依据GenBank中公布的P.sojae无毒基因Avr1a、Avr1k和Avr3a的序列设计引物,分别筛选出特异性引物,在PCR反应体系和扩增条件优化基础上,对已经接种鉴定过无毒基因Avr1a、Avr1k和Avr3a的86株P.sojae进行PCR检测,建立一套P.sojae无毒基因Avr1a、Avr1k和Avr3a的特异性检测体系.将分子鉴定和接种鉴定结果进行比对,将扩增出的真阳性条带和假阳性条带分别进行胶回收和克隆测序,测序结果分别与3个无毒基因的原序列比对,判定分子标记方法是否适于Avr1a、Avr1k和Avr3a的快速检测.[结果]筛选出的特异性引物均能从含有对应无毒基因的菌株中扩增出约550 bp的条带.Avr1a、Avr1k 和Avr3a的分子鉴定及接种鉴定结果符合率依次为45.3％、84.9％和97.7％.3个无毒基因的真阳性条带序列与原序列一致性均达97％以上,Avr1a的假阳性条带与原序列一致性在80％左右,其余2个基因的都在30％以下.[结论]利用Avr1a、Avr1k和Avr3a基因序列分别设计引物建立的检测体系可以用于Avr3a的快速检测,不适于Avr1a的快速检测,是否适合Avr1k的快速检测尚不清楚.

关键词：大豆疫霉菌、无毒基因、Avr1a、Avr1k、Avr3a、分子鉴定

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资助基金：公益性行业科研专项项目201303018

在线出版日期：2013-04-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1533-1539