斜卧青霉L-06内切葡聚糖酶I基因的克隆与表达

摘要：

[目的]克隆斜卧青霉L-06的内切葡聚糖酶Ⅰ基因(egI),并实现其在大肠杆菌内的高效表达.[方法]利用RT-PCR技术克隆了斜卧青霉L-06的内切葡聚糖酶Ⅰ基因(egI),并将egI基因克隆到原核表达载体中,构建了重组质粒pET32a-egI.[结果]转化至大肠埃希菌Rosetta(DE3),经IPTG诱导重组蛋白表达,SDS-PAGE检测结果表明:重组表达产物的相对分子质量约为80 kD,与预期相符.重组表达的菌悬液,经破碎离心,取其上清液,进行纤维素酶活性染色,获得了活性条带.DNS法测得内切酶活力为2.56 IU/mL.[结论]构建了斜卧青霉L-06内切葡聚糖酶Ⅰ的原核表达系统.

关键词：斜卧青霉L-06、内切葡聚糖酶Ⅰ、克隆、原核表达

所属期刊栏目：39

分类号：Q785(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金41076106;广东省自然科学基金S2011030005257;广东省科技计划项目2009B090300346;广东高校科技创新重点项目CXZD1124

在线出版日期：2012-10-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：696-701