特异腐质霉内切葡聚糖酶Ⅱ基因在毕赤酵母中的表达及酶学性质
[目的]在毕赤酵母中表达特异腐质霉Humicola insolens的中性内切葡聚糖酶Ⅱ,并对其性质加以研究.[方法]利用RT-PCR的方法,以特异腐质霉(Humicola insolens)NC3总RNA为模板,克隆到中性内切葡聚糖酶Ⅱ基因(egⅡ的cDNA.将其插入表达载体pPIC9K,重组质粒经线性化后电击转化毕赤酵母(Pichia pastoris)菌株GS115.[结果]SDS-PAGE和酶活的检测结果均表明:egⅡ基因在毕赤酵母中成功表达.重组酶的部分酶学性质研究表明,该酶的最适反应温度为70℃,且在65℃以下具有较好的热稳定性.最适反应pH为6.5,在pH 6.0-7.0之间有较好的稳定性.[结论]用重组毕赤酵母可高效表达外源中性内切葡聚糖酶,为其今后在工业应用奠定了基础.
中性内切葡聚糖酶Ⅱ、特异腐质霉、毕赤酵母
39
Q78(基因工程(遗传工程))
基金福建省发改委产业化关键技术项目闽发改投资[2009]958号
2012-05-17(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
145-153