抑菌蛋白Reg3A的表达纯化与功能

摘要：

利用原核表达系统表达人源抑菌蛋白Reg3A,经包涵体的复性和纯化获得有体外抑菌功能的活性抑菌蛋白,并对其体外抑菌功能进行初步研究.构建Reg3A原核表达载体PET-32a-Reg3A转化补充稀缺tRNA基因的表达菌株大肠杆菌BL21-Codonplus,阳性重组子采用诱导培养基诱导5 h后,采用超声破碎的方法提取包涵体蛋白,经包涵体蛋白的纯化和透析复性后通过Ni-NTA亲和层析交换柱,获得纯度达95%的蛋白质.Western blot鉴定显示在15 kD处有特异性条带.使用纯化后的蛋白进一步进行抑菌圈实验和抑菌活性实验,对获得蛋白的体外抑菌活性进行评估,从而为进一步进行Reg3A蛋白功能的评估及应用奠定基础.

关键词：抑菌蛋白Reg3A、包涵体复性、抑菌活性

所属期刊栏目：38

分类号：Q492.4

资助基金：广东省重点实验室建设经费支持项目2004B60144

在线出版日期：2011-11-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1249-1255