β-脱卤酶的基因克隆表达及其酶学性质

摘要：

根据GenBank中的序列设计引物,克隆芽孢杆菌中的β-脱卤酶基因(命名为6hd).以pET30a(+)为载体、Escherichia coli BL21(DE3)-CondonPlus为宿主菌,实现了bhd的高效表达.使用HisTrap<'TM>FF亲和层析柱纯化重组β-脱卤酶,分子量约为23.1 kD.酶学性质研究表明,纯化的重组β-脱卤酶水解3-氯丙酸制备3-羟基丙酸的最适反应体系为30℃,100 mmol/L,pH 7.0的磷酸钠缓冲液.在最适反应条件下,重组β-脱卤酶的比活为16.2 U/mg,K<,m>和V<,max>分别为3.26 μmol/L和17.86 mmol/(min·g protein).在最适反应条件下,以10 mmol/L 3-氯丙酸为底物,反应36 h的转化率在93%以上.

关键词：芽孢杆菌、β-脱卤酶、3-羟基丙酸

所属期刊栏目：38

分类号：Q939.121(微生物学)

在线出版日期：2011-11-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1160-1165