地芽孢杆菌Y565-5分离鉴定及其木糖异构酶基因xylA的克隆表达和酶学性质

摘要：

从甘肃玉门油田地表土中分离到一株嗜热木糖利用菌,地芽孢杆菌Y565-5.利用PCR方法从该菌株中克隆得到一个木糖异构酶基因,xylA.该基因开放阅读框长1 182 bp,编码394个氨基酸,XylA氨基酸序列与Geobacillus sp.Y412MC52相似性达到99%.将xylA基因克隆到原核表达载体pET-28a(+)上,得到重组质粒pET-28a(+)-xylA,然后将此重组质粒转化至BL21(DE3)中,经IPTG诱导后,通过SDS-PAGE电泳检测出明显的45 kD(相对分子质量)特异性蛋白质条带,并且通过半胱氨酸咔唑法检测出表达产物具有木糖异构酶的活性.对其酶学性质的研究发现,XylA最适温度为90℃,最适pH值为8.0.

关键词：Geobacillus sp.Y565-5、木糖异构酶、克隆、表达

所属期刊栏目：38

分类号：Q558(酶)

资助基金：纤维素乙醇高温发酵与生物炼制子课题KSCX1-YW-11E;中国科学院知识创新工程重要方向项目KZCX2-YW-Q05-05

在线出版日期：2011-11-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1147-1154