毛霉△6-脂肪酸脱氢酶随机突变文库的构建与分析
毛霉Mucor sp.EIM-10△6-脂肪酸脱氢酶是γ-亚麻酸合成途径的关键酶.为提高脂肪酸脱氢酶的活性以及研究该酶一级结构对酶活性的影响,利用易错PCR对毛霉△6-脂肪酸脱氢酶基因(mca6)进行随机突变,将PCR产物与大肠杆菌-酿酒酵母穿梭表达载体PYMD6PMCD6连接,获得随机突变质粒PYTBMCD6,转化酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae,构建了原始库容为4.6x104 CFU的△6-脂肪酸脱氢酶的随机突变表达文库.随机突变表达丈库的构建与分析为定点突变等酶蛋白的理性设计奠定基础.
6-脱氢酶、易错PCR、随机突变、毛霉、γ-亚麻酸
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TQ925(其他化学工业)
国家自然科学基金项目30970047;30370028;福建省自然科学基金重大项目2003F005;福建省自然科学基金项目2008F3036;福建省教育厅资助项目JB09035
2011-09-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
694-701