改良DAS-Dot-ELISA检测西瓜细菌性果斑病菌

摘要：

以硝酸纤维素膜为载体,对Dot-ELISA法的封闭条件、包被抗体浓度、点样量等反应条件进行优化,建立改良DAS-Dot-ELISA法快速检测西瓜细菌性果斑病菌.研究发现,以含乙二胺四乙酸二钠(EDTA)的脱脂奶粉液高温处理后用于封闭,可有效降低背景;轻微振荡可提高杂交效率,减少非特异性结合.改良DAS-Dot-ELISA可快速、经济的检测西瓜果斑病菌,灵敏度达1.9×105CFU/mL.在对两批次种子样品的检测中,改良DAS-Dot-ELISA法检测带菌率分别为8.0%和6.0%,与微孔板ELISA结果完全一致:对每粒种子的检测结果,改良DAS-Dot-ELISA法与微孔板ELISA吻合率平均达99.0%,显示较好的实用前景,同时为快速检测西瓜果斑病菌提供一种新途径.

关键词：西瓜细菌性果斑病菌、双抗体夹心Dot-ELISA、硝酸纤维素膜、快速检测

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分类号：S436.5(病虫害及其防治)

资助基金：国家质量监督检验检疫总局项目2007IK259;2009IK276;甘肃省科技厅中小企业创新基金计划项目0802NCCA028

在线出版日期：2011-07-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1551-1556