半定量RT-PCR检测运动发酵单胞菌中外源基因转录水平的研究

摘要：

本研究运用半定量RT-PCR法检测运动发酵单胞菌重组茵中外源基因xylB的转录水平.提取野生型运动发酵单胞菌CP4及其2个重组菌的总RNA,检测无DNA污染后定量至同一浓度、并反转录为cDNA.观测目的基因xylB和内标基因16S rRNA的PCR扩增曲线、并确定合适的循环数,选用相同量的cDNA为模板,PCR检测各样本中xylB相对16S rRNA的转录水平.结果表明野生型菌株CP4中xylB基因没有转录,而两株重组菌中皆有xylB的转录本,且转录丰度基本一致,酶活测定也进一步证实该基因在重组茵中有效表达.该方法可用于鉴定运动发酵单胞茵中特定基因的转录水平,是一种快速有效的检测方法.

关键词：运动发酵单胞菌、半定量RT-PCR、基因表达

所属期刊栏目：36

分类号：Q93(微生物学)

资助基金：国家自然科学基金30600369

在线出版日期：2009-09-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：831-836