黄色短杆菌GDK-9谷氨酸脱氢酶基因的克隆、序列分析及表达

摘要：

利用PCR技术从黄色短杆菌GDK-9的基因组DNA中扩增出谷氨酸脱氢酶基因(gdh)片段(EC.1.4.1.4),连到pUCm-T载体上测序.核酸序列分析结果表明,该片段全长1927 bp.包含一个ORE推测此ORF区编码一条448个氨基酸的多肽,分子量约为48 kD.与已报道的gdh序列相似性为99.55%,其中1190位碱基(C→A)突变导致了编码氨基酸的变化(Thr→Asn),其它的碱基变化不影响编码的氨基酸.将gdh基因克隆入穿梭质粒pXMJ19中,并转化E.coli XL-Blue和Brevibacterium flavum GDK-9,经IPTG诱导后,SDS-PAGE电泳结果显示,在预计位置出现明显的诱导蛋白条带,分子量约为48.7 kD.谷氨酸发酵实验表明,尽管谷氨酸脱氢酶GDH能明显提高胞内的谷氨酸含量,但其不影响谷氨酸的分泌.

关键词：谷氨酸脱氢酶、基因克隆、表达

所属期刊栏目：36

分类号：Q93(微生物学)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2006AA020301

在线出版日期：2009-09-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：804-808