泰山土壤宏基因组DNA中耐热β-半乳糖苷酶基因的克隆、表达及性质

摘要：

从泰山土壤宏基因组文库中发现可能的β-半乳糖苷酶基因pwtsA,将其克隆到表达载体pET30a,转化E. coli BL21(DE3).工程菌在IPTG诱导下高效表达可溶性的重组蛋白PWTSA,分子量为57 kD,与预期大小一致.PWTSA能够水解ONPG产生o-硝基酚,酶活力为13.6 U/mg,确证了重组蛋白为β-半乳糖苷酶.PWTSA的最适反应温度在85℃-95℃之间,最适pH值为6.5,对90℃左右的高温有很好的耐受力.在标准反应条件下,酶作用于底物ONPG的米氏常数Km为0.83 mmol/L.

关键词：β-半乳糖苷酶、宏基因组、pwtsA、基因表达

所属期刊栏目：35

分类号：S15;S88

资助基金：山东省医药卫生科技发展计划项目资助2007HZ036

在线出版日期：2009-02-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1686-1690