MGB(Minor Groove Binder)复合探针二重实时定量PCR检测大肠杆菌O157

摘要：

以大肠杆菌O157rfbE和stx2为待检靶基因,设计两对引物和两条MGB探针,rfbE和stx2探针5'端分别用FAM和VIC基团标记,3'端均用Taqman-MGB标记.建立并优化了检测大肠杆菌O157的二重荧光定量PCR方法,可检测的最低DNA浓度是10拷贝/μL;实验中O157菌株检测结果均为rfbE阳性,而非O157菌株检测结果均为阴性;重复性实验中,批间差异小于80%,批内差异小于70%.实验结果显示此二重荧光定量PCR方法可对分离的可疑大肠杆菌O157菌株进行快速鉴定,同时得知菌株是否携带stx2毒力基因,有利于菌株毒力强弱的判定.

关键词：大肠杆菌O157、荧光定量PCR、MGB探针、rfbEE、stx2

所属期刊栏目：34

分类号：Q93-3(微生物学)

资助基金：上海市科技兴农科技攻关项目沪农科攻字2004第11-4号;上海市科委资助项目05dz05012

在线出版日期：2007-12-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：897-900