10.3969/j.issn.0253-2654.2006.05.008
Aeropyrum pernix K1磷脂酶A2的克隆、表达及其性质
从超嗜热需氧古细菌Aeropyrum pernix K1中抽提出染色体基因组,经PCR扩增得到磷脂酶A2基因,用带有His-tag标记的pET15b作为表达载体,在大肠杆菌BLP中成功地诱导表达.表达产物经过Ni-螯合柱一步得到纯化.SDS-PAGE检测只有一条带,其准确分子量为17,871kD.对纯化后的磷脂酶A2测定其酶活性和生物活性,得出其最适反应温度为90℃,最适pH范围为7.8~8.2.至此首次成功地在大肠杆菌中表达了古细菌嗜热磷脂酶A2,这将为以后对该酶的结构和功能以及耐热机制研究打下很好的基础,同时有利于古细菌研究领域的扩展.
Aeropyrum pernix K1、磷脂酶A2、古细菌、热稳定性
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Q78(基因工程(遗传工程))
2006-11-07(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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