利用λ-Red重组系统和平衡致死系统改造抗药性致腹泻工程疫苗

摘要：

质粒pMM085是含有猪毒素源性大肠杆菌(ETEC)的黏附素K88与无毒肠毒素LTA-B+基因的重组质粒,含氯霉素抗性基因,由此构建的菌苗株带有抗药性.利用平衡致死系统改建此疫苗株,即将质粒上的氯霉素抗性基因cat替换成asd基因,并把新构建的质粒转移到缺失asd基因的大肠杆菌X6097中.但由于质粒pMM085是一个23kD的大质粒,传统的基因工程操作不易进行,利用λ-Red重组系统,将表达Red重组蛋白的质粒pKD46转化含pMM085的大肠杆菌X6097,并用两端各带有39nt cat基因同源区、含全长asd基因的PCR产物电击转化此感受态细胞,在λ-Red重组系统的帮助下,成功实现了asd基因对cat基因的置换.

关键词：λ-Red重组系统、抗药性基因、平衡致死系统

所属期刊栏目：33

分类号：Q93(微生物学)

在线出版日期：2006-05-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：10-15